二氧化碳培養箱的滅菌消毒

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1. 二氧化碳培養箱的滅菌消毒方式

二氧化碳培養箱中的微生物往往會對培養的結果產生一定的影響，常見的微生物處理方式包括物理過濾和滅菌，下面讓我們一起來探討兩種方式。

1.1 物理過濾

將箱體內氣體通過過濾器循環，使箱體內氣體潔凈度達到一定的級別(常見UPLA過濾器為1級、HEPA 過濾器為 100 級);主要作用是保持箱體內潔凈度，保證培養箱體內的環境，但對微生物及病毒不起到任何的殺滅作用，僅僅是將箱體內的微生物過濾到過濾器內，這樣需要對過濾器進行定期更換，采用物理過濾的培養箱更適合于環境條件較好的實驗室。

1.2 滅菌

殺滅或清除傳播媒介上的所有微生物(包括芽胞)，使之達到無菌程度。經過滅菌的物品稱“無菌物品”，培養箱內的無菌處理是指殺滅所謂微生物、病毒等，徹底避免環境對樣本的影響，以及消除不同樣本之間的交叉污染。根據不同的去除對象以及應用環境需求，采用有效的方法。

1.2.1 微生物分類

根據微生物的抵抗能力不同，可將微生物分為如下幾類：

① 細菌繁殖體：易被一般的消毒劑殺滅，一般革蘭氏陽性細菌對消毒劑較敏感，采用化學消毒效果較為明顯;革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力，一般的化學消毒效果不明顯，但對熱敏感，采用熱力學方法效果明顯。

② 細菌芽孢和真菌芽孢：有厚厚的孢子壁，對化學消毒劑有較強的抵抗力，一般的化學消毒對芽孢效力有限;消毒能力強的化學試劑對芽孢有一定的殺滅作用，但對濃度、處理方法等要求嚴格;常見的方法是采用熱力學方法。

③ 病毒：種類較多，不同病毒種類對外界的抵抗能力不同，化學試劑消毒的效果也不相同，RNA活性受溫度影響明顯，一般采用熱力學方法去除。

④ 真菌：普遍對環境抵抗能力強，一般的紫外消毒方式和化學試劑消毒達不到預期的效果，通常采用熱力學方法處理，煮沸或使用高壓滅菌燈。

1.2.2 熱力學滅菌方法

培養箱內常見的熱力學滅菌方法包括干熱滅菌和濕熱滅菌。

①干熱滅菌：將箱體內加熱到120℃以上，濕度為20% 以內，持續一定的時間，通過高溫使蛋白質及核酸變性失活，達到殺滅的目的。有些真菌芽孢，由于厚厚的細胞壁保護，能夠抵抗一定的高溫，滅菌不能徹底。

②濕熱滅菌：在高溫的同時保持箱體內飽和濕度，達到徹底滅菌效果。

濕熱滅菌相比于干熱滅菌，主要優點是：

①濕熱滅菌中的菌體吸收水分，蛋白質含水量增高，所需凝固溫度降低，易凝固變性;

②高溫水蒸汽對蛋白質有極高的穿透力，從而加速蛋白質變性而迅速死亡;

③蒸汽有潛熱存在，能迅速提高菌體的溫度，從而增加滅菌效力。

由此可見，培養箱采用濕熱滅菌是一種可行且效果極佳的滅菌方法，能徹底消滅細菌、真菌、孢子、病毒等微生物且沒有二次污染。一個季度采用一次高溫滅菌，消除潛在的污染風險。